以下我们介绍一下荧光分光光度计的原理，荧光分光光度计具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有ji和无机化学等领域。

（1）当荧光物质本身为强酸或强碱时，溶液pH的改变对荧光强度也有很大的影响，故测定时应保持pH值一致。

（2）溶液中的溶氧有降低荧光作用，迟到与荧光物质的浓度不呈线性关系，这种现象称为"荧光熄灭"。必要时，可在测定前通入惰性气体除氧。

（3）测定用的玻璃仪器与样品池等必须保持高度洁净。

（4）荧光分析因灵敏度高，溶剂不纯会带入较大荧光，故应作空白检查，必要时，可用玻璃磨口蒸馏后再用。

（5）对易被光分解的品种，可选择一激发光波长和发射光波长与之近似；而对光稳定的物质的溶液，先与对照溶液以校正仪器的灵敏度。例如蓝色荧光可用硫酸奎宁的硫酸溶液，黄绿色荧光可用荧光素钠水溶液，红色荥光可用罗丹明B水溶液。

（6）溶液中的悬浮物对光有散射作用，如果荧光光谱与此种散射光重叠，就会影响荧光的测量，因而在测定前应设法将散射光除去可用垂熔玻璃过滤或用离心法除去。

（7）温度对荧光强度有较大的影响，测定时应控制温度一致。

荧光分光光度计在仪器校验使用前应仔细阅读说明书，实验结束后，要及时的清理台面，处理废液，清洗和放置好样品池，将下次要用的溶液放回冰箱，并且按规定登记实验记录，养成良好的实验习惯，在测试样品时，注意荧光强度范围的设定不要太高，以免测得的荧光强度超过仪器的测定上限。