免疫检测相关方法介绍

免疫力低下人群易患肿瘤：肿瘤的发生、发展、复发率和存活期等都与机体的免疫状态有密切关系。

人类的免疫系统由免疫器官、免疫细胞、免疫分子和淋巴循环网组成。免疫细胞通过血液循环前往全身各器官和组织。

通过对人体外周血中的T淋巴细胞亚群比例变化的定量分析、T细胞抗原受体（T CELL RECEPTOR, TCR）多样性变化的定性与定量分析判断人类个体的细胞免疫应答能力（包括抗肿瘤能力和抗感染能力），以指导临床抗肿瘤治疗方案的确定。

检测方法：

（一）免疫酶染色试验 （immunoenzyme staining test，IEST） 免疫酶染色试验以含寄生虫病原的组织切片、印片或培养物涂片为固相抗原，当其与待测标本中的特异性抗体结合后，可再与酶标记的第二抗体反应形成酶标记免疫复合物，后者可与酶的相应底物作用而出现肉眼或光镜下可见的呈色反应。

（二）皮内试验 （intrader rpmal test,ID） 宿主在病原体刺激后，体内产生亲细胞性抗体（IgE和IgG4）。

当其与相应抗原结合后，肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放生物活性物质，引起注射抗原的局部皮肤出现皮丘及红晕，以此便可判断体内是否某有种特异性抗体存在。

（三）免疫扩散（immunodiffusion）和免疫电泳（immunoelectrophoresis）

1．免疫扩散 于一定条件下，抗原与抗体在琼脂凝胶中相遇，在二者含量比例合适时形成肉眼可见的白色沉淀。本法有两种类型：①单相免疫扩散：将一定量的抗体混入琼脂凝胶中，使抗原溶液在凝胶中扩散而形成沉淀环，其大小与抗原量成正比；②双相免疫扩散：将抗原与抗体分别置于凝胶板的相对位置，二者可自由扩散并在中间形成沉淀线。用双相免疫扩散法既可用已知抗原检测未知抗体，也可用已知抗体检测未知抗原。

2．免疫电泳 是将免疫扩散与蛋白质凝胶电泳相结合的一项技术。计量校准事先将抗原在凝胶板中电泳，之后在凝胶槽中加入相应抗体，抗原和抗体双相扩散后，在比例合适的位置，产生肉眼可见的弧形沉淀线。

（四）酶联免疫吸附试验 （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）

vvv 酶联免疫吸附试验原理是将抗原或抗体与底物（酶）结合，使其保持免疫反应和酶的活性。把标记的抗原或抗体与包被于固相载体上的配体结合，再使之与相应的无色底物作用而显示颜色，根据显色深浅程度目测或用酶标仪测定OD值判定结果。

（五）对流免疫电流试验 （counter-immunoelectrophoresis，CIE） 对流免疫电泳试验是以琼脂或琼脂糖凝胶为基质的一种快速，敏感的电泳技术。既可用已知抗原检测抗体，又可用已知抗体检测抗原。

反应结果可信度高，适用范围广。

以本法为基础改进的技术有酶标记抗原对流免疫电泳（enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE ）和放射对流免疫电泳自显影（radio-immuno-counterelectrophoretic autography，RCIEPA）等技术。

二者克服了电泳技术本身不够灵敏的弱点。